课程代码:10271819
课程名称:人体寄生虫学
英文名称:Human Parasitology
课程类型:学科基础课
课程性质:选修课
授课对象:白求恩医学班
开课学期:第3短学期
课程学时:22学时
选用教材:《基础医学教程》李凡主编 高等教育出版社2002年
授课地点:免疫病原遗传细胞生物学实验中心
执 笔 人:李淑红(教 授)
审 核 人:李淑红(教 授)
编写单位:病原生物学系
编写日期:2010年9月
一、实验教学目标
人体寄生虫学实验教学是完成人体寄生虫学教学的重要手段和环节,依托免疫、病原、遗传、细胞生物学实验教学中心共同完成。
实验教学通过虫体标本的观察,掌握寄生虫的形态学特点,通过病理标本的观察,掌握和进一步理解寄生虫对人体的致病作用及特点。通过实验操作,掌握常用的寄生虫感染的实验诊断技术,训练和培养动手能力,提高基本技能。通过完成课堂作业,了解生物绘图方法并强化寄生虫形态学方面知识的记忆。通过节肢动物的观察,学会对其主要特点的描述和分类检索表的使用。通过免疫学和分子生物学的实验技术操作,了解寄生虫病实验诊断的新方法、新技术,启发思维,拓宽思路,并培养创新精神。
通过教学实践过程,理论联系实际,培养学生扎实的学科专业知识、实验技能和较强的创新思维能力、分析解决问题的能力。
二、实验学时分配
序号
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实验项目名称
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实验教学类型
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实验性质
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实验学时
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1
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线虫
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基础性实验
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必修
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4
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2
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吸虫
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基础性实验
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必修
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2
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3
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绦虫
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基础性实验
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必修
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2
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4
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原虫
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基础性实验
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必修
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8
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5
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节肢动物
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基础性实验
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必修
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2
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6
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粪便检查
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基础性实验
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必修
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2
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7
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实验考试
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必修
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2
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总计
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22
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三、实验教学内容:
实验一 线虫 (4学时)
Nematode
【实验要求】
掌握:生物显微镜的正确使用方法;蛔虫卵、鞭虫卵、蛲虫卵和钩虫卵的形态特征;旋毛虫幼虫囊包的形态特征;班氏微丝蚴和马来微丝蚴形态特征和鉴别要点;蛔虫、鞭虫、蛲虫和钩虫成虫的外部形态特点;十二指肠钩虫和美洲钩虫的鉴别要点。诊断肠道寄生虫常用的粪便直接涂片法和饱和盐水浮聚法。
熟悉:改良加藤氏法(定量透明虫卵计数法)。
了解:旋毛虫和丝虫成虫的外部形态;检查丝虫微丝蚴的厚血膜涂片法。
【实验内容】
1.线虫的形态结构观察
(1)观察标本:受精蛔虫卵、未受精蛔虫卵、鞭虫卵、钩虫卵、蛲虫卵、班氏微丝蚴、马来微丝蚴、肌肉内旋毛虫幼虫囊包。
(2)示教标本:蛔虫成虫、蛔虫唇瓣、蛔虫成虫引起并发症的大体标本(肠梗阻、肠穿孔、胆道蛔虫症、肝脓肿等)、鞭虫成虫、鞭虫寄生在肠粘膜、蛲虫成虫、蛲虫前端的头翼和食道球、丝虫成虫、晚期丝虫病人照片、丝虫中间宿主-蚊、旋毛虫成虫、十二指肠钩虫和美洲钩虫成虫 两种钩虫的口囊和雄虫交合伞(镜下观)钩虫寄生在肠壁。
2.线虫感染的常规实验诊断技术:粪便直接涂片法;粪便饱和盐水浮聚法;改良加藤氏法(定量透明虫卵计数法)。
3.电视录像:线虫。
【仪器设备】
生物显微镜
实验二 吸虫(2学时)
Trematode
【实验要求】
掌握:华支睾吸虫卵、卫氏并殖吸虫卵、姜片吸虫卵和日本血吸虫卵的形态特征。粪便倒置沉淀集卵法和氢氧化钠消化法。
了解:华支睾吸虫、卫氏并殖吸虫、姜片吸虫和日本血吸虫成虫的形态特征;动物血吸虫尾蚴的形态特征;吸虫生活史的规律;环卵沉淀试验。
【实验内容】
1.吸虫的形态结构观察
(1)观察标本: 华支睾吸虫卵、卫氏并殖吸虫卵、姜片吸虫卵和日本血吸虫卵。
(2)示教标本: 华支睾吸虫(大体)、华支睾吸虫成虫染色标本(镜下观)、华支睾吸虫寄生在肝胆管内、华支睾吸虫中间宿主-沼螺、麦穗鱼、卫氏并殖吸虫成虫、卫氏并殖吸虫成虫内部结构(镜下观)、卫氏并殖吸虫寄生在狗的肺脏(病理标本)、卫氏肺吸虫中间宿主(川卷螺、溪蟹、蝲蛄)、布氏姜片吸虫成虫、布氏姜片吸虫中间宿主和传播媒介-扁卷螺、荸荠、菱角、日本血吸虫成虫、日本血吸虫病患者直肠组织压片(镜下观)、日本血吸虫寄生在家兔肠系膜静脉内(瓶装标本)、日本血吸虫虫卵所致病肝病理标本(瓶装标本)、日本血吸虫中间宿主(湖北钉螺)、吸虫幼虫(毛蚴、尾蚴、囊蚴 )。
2.吸虫感染的实验诊断技术
(1)病原学诊断技术: 粪便倒置沉淀集卵法、痰液氢氧化钠消化法(检查肺吸虫卵)粪便水洗沉淀法检查血吸虫卵。
(2)免疫学诊断技术:环卵沉淀试验。
3.电视录像:吸虫 。
【仪器设备】
生物显微镜、离心机及试剂、生化培养箱
实验三 绦虫(2学时)
Cestode
【实验要求】
掌握:带绦虫卵的形态特点;猪带绦虫和牛带绦虫成虫的鉴别要点;囊尾蚴和棘球蚴的形态特征;囊尾蚴病的病原学诊断方法和免疫学诊断方法。
熟悉:常见种类绦虫的形态鉴别。
了解:微小膜壳绦虫卵的形态特点。
【实验内容】
1.绦虫的形态结构观察
(1)观察标本: 带绦虫卵、棘球蚴砂、猪带绦虫头节、牛带绦虫头节、猪带绦虫妊娠节片、牛带绦虫妊娠节片(墨汁注射标本)。
(2)示教标本: 猪带绦虫囊尾蚴、猪带绦虫成虫、牛带绦虫成虫、猪囊尾蚴寄生在(猪肌肉、猪脑、猪心、猪眼等)组织内(大体标本)、 微小膜壳绦虫成虫、 微小膜壳绦虫卵 、细粒棘球绦虫成虫、棘球蚴寄生在肝内的大体标本、曼氏迭宫绦虫裂头蚴 。
2. 绦虫感染的实验诊断技术
(1)病原学诊断技术:活组织检查法——肌肉压片法(囊尾蚴)。
(2)免疫学诊断技术:酶联免疫吸附试验——血清抗囊虫抗体检测。
3.电视录像:绦虫。
【仪器设备】
生物显微镜、生化培养箱、离心机、酶标仪
实验四 原虫(8学时)
Protozoa
【实验要求】
掌握:常见肠道原虫的形态特征;常见肠道原虫包囊形态的鉴别要点;阴道毛滴虫的形态特点;杜氏利什曼原虫无鞭毛体的形态特点;间日疟原虫和恶性疟原虫红细胞内期各期形态特点;弓形虫滋养体的形态特征;碘液染色检查肠道原虫包囊的方法、阴道分泌物涂片染色检查阴道滴虫的方法和厚、薄血膜涂片染色检查红内期疟原虫方法。
熟悉:蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的形态特点;弓形虫的动物保种。
了解:杜氏利什曼原虫无鞭毛体的病原学检查方法。
【实验内容】
1.原虫形态结构的观察
(1)观察标本: 溶组织内阿米巴包囊(苏木素染色标本、油镜观察)、结肠内阿米巴包囊(苏木素染色标本、油镜观察)、蓝氏贾第鞭毛虫包囊(苏木素染色标本、油镜观察)、阴道毛滴虫(姬氏染色标本、油镜观察)、杜氏利什曼原虫无鞭毛体(骨髓涂片染色标、油镜观察)、间日疟原虫红细胞内期虫体(环状体、滋养体、裂殖体、配子体(薄血膜染色标本、油镜观察)、弓形虫滋养体(染色标本、油镜观察)。
(2)示教标本:溶组织内阿米巴大滋养体(苏木素-伊红染色标本、油镜观察)、结肠内阿米巴滋养体(苏木素染色标本、油镜观察)、结肠内阿米巴包囊碘液染色标本(高倍镜观察)、蓝氏贾第鞭毛虫滋养体(苏木素染色标本、油镜观察)、杜氏利什曼原虫前鞭毛体(染色标本、油镜观察)、感染杜氏利什曼原虫的田鼠脾脏(大体标本)、杜氏利什曼原虫的传播媒介--白蛉(封固玻片标本、显微镜观察)、恶性疟原虫环状体、配子体(薄血膜染色标本、油镜观察)、间日疟原虫卵囊形态(染色标本、高倍镜观察)、间日疟原虫子孢子(染色标本、高倍镜观察)、疟原虫的传播媒介-中华按蚊、嗜人按蚊(针插大体标本)。
2.原虫感染的实验诊断技术
(1)病原学诊断技术:薄、厚血膜涂片染色法;阴道分泌物涂片染色法;碘液染色法。
(2)免疫学诊断技术:ELISA——血清抗弓形虫抗体检测。
3.动物实验
弓形虫的实验感染——小白鼠腹腔接种弓形虫滋养体。
4.电视录象:原虫。
【仪器设备】
生物显微镜、生化培养箱、高压蒸汽灭菌器、超净台
实验五 节肢动物 (2学时)
Arthropod
【实验要求】
掌握:按蚊属、库蚊属、伊蚊属三属蚊幼虫的主要区别。蠕形螨的实验检查方法。
了解:按蚊属、库蚊属、伊蚊属三属蚊成虫的主要区别。蝇、蚤、虱、硬蜱、软蜱、疥螨等的一般形态特点。
【实验内容】
1.节肢动物的形态结构观察
(1)标本观察:三属蚊幼虫(玻片标本、低倍镜观察)、蚤(玻片标本、低倍镜观察)、虱(玻片标本、低倍镜观察)、硬蜱(玻片标本、低倍镜观察)、蠕形螨(自检标本、低倍镜观察)。
(2)示教标本:中华按蚊、淡色库蚊、白纹伊蚊(针插标本、放大镜观察)、蚊生活史(瓶装、大体标本)、蝇头(玻片标本、低倍镜观察)、蝇足(玻片标本、低倍镜观察)、蝇生活史(瓶装、大体标本)、耻阴虱成虫(玻片标本、低倍镜观察)、虱卵(玻片标本、显微镜观察)、硬蜱生活史(瓶装、大体标本)。
2.节肢动物感染的实验诊断技术:透明胶带法——蠕形螨的检查 。
3.电视录像:医学节肢动物。
【仪器设备】
生物显微镜、玻片、透明胶带
实验六 粪便检查 (2学时)
Examination of faeces
【实验要求】
掌握:生理盐水直接涂片法;碘液染色法;饱和盐水浮聚法。
了解:肠道寄生虫的感染情况。
【实验内容】
1.技术操作: 生理盐水直接涂片法;饱和盐水浮聚法;碘液染色法。
2.注意事项:保持实验室卫生,防止粪便污染环境,用过的实验检查材料放置指定地点,统一处理。
3.电视录像:粪便检查。
【仪器设备】
生物显微镜、玻片、生理盐水、饱和盐水、碘液
实验七 实验考试(2学时)
Experiment examination
【考试要求】
1.在教师引领下进入考场,按学号顺序入座。
2.严格遵守考试纪律,违者后果自负。
3.每个标本观察1分钟,考试结束后,将答卷翻放在原位,退场,监考教师收卷。
【考试内容】
大体标本3个;玻片标本7张。
【仪器设备】
生物显微镜
四、实验成绩考核与评定方式
本课程实验考核成绩由实物标本考试或实验技术操作、实验理论笔答考试和实验报告三部分组成,占总成绩的20%。
1.实物标本考试占实验总成绩的80%,以常见、重要的虫体种类尤以具有临床病原学、实验诊断和流行病学意义的发育时期为主要考试内容,共计10个标本,包括线虫、吸虫、绦虫、原虫及节肢动物等各占相应比例。
2.实验技术操作考核主要考核肠道蠕虫感染的常规检查方法。
3.实验理论笔试占10%。实验报告占10%。
对实验成绩不合格者及实验缺席者,本课程将不准予通过。